現在許多科研單位和花木生(sheng)產(chan)企(qi)業都已(yi)配置了組織培養(yang)室(shi)。組培技術已(yi)成(cheng)為重要的(de)生(sheng)物(wu)技術之(zhi)一(yi)。然而有(you)的(de)組培室(shi)組培苗的(de)數量和質量卻一(yi)直沒有(you)質的(de)飛躍,究其原因,最主要的(de)因素就是污染(ran)所(suo)造成(cheng)的(de)。被污染(ran)后首先是生(sheng)產(chan)成(cheng)本的(de)提高;其二,對植株造成(cheng)傷害(hai);其三,增(zeng)加接種(zhong)源(yuan)受污染(ran)的(de)機率(lv)。亞(ya)龍組培特整理(li)此(ci)篇內(nei)容分享給大家,希望對有(you)這方面困惑的(de)朋友有(you)幫助!
組培室常見污染源
組織培養過程中的污染源(yuan)主要(yao)有(you)以下幾種:
(1)戶外風大,菌(jun)(jun)類(lei)進(jin)屋機會多。有(you)(you)風就(jiu)有(you)(you)沙(sha)(sha),有(you)(you)沙(sha)(sha)就(jiu)有(you)(you)塵,有(you)(you)塵就(jiu)有(you)(you)菌(jun)(jun),菌(jun)(jun)塵共存,這是菌(jun)(jun)類(lei)進(jin)屋的主要原因之一。
(2)屋內(nei)(nei)太潮,菌類繁衍(yan)多(duo)。需保(bao)持室內(nei)(nei)空氣干(gan)燥(zao),如使用空調“除濕”功能,也可減少真菌生長繁殖。
(3)人(ren)員帶菌(jun)多。在整個操作室(shi)內,人(ren)員可(ke)說是最大的帶菌(jun)者,不管在毛發(fa)或(huo)是衣服等地方(fang),都隱藏著(zhu)數不清(qing)的菌(jun)類。在進(jin)入操作室(shi)前(qian)(qian),最好能對作業(ye)人(ren)員進(jin)行清(qing)潔處理,比如換上(shang)干凈的白大褂(gua),換上(shang)實驗(yan)室(shi)的鞋,衣服鞋每星(xing)期洗(xi)一次(ci),上(shang)超(chao)凈臺前(qian)(qian)手要用肥皂清(qing)洗(xi)兩遍(bian),接種前(qian)(qian)手再(zai)用酒精擦拭一遍(bian)。
(4)屋內不干凈。紫(zi)外(wai)線能(neng)殺滅(mie)或抑制真菌生長(chang),因此應(ying)在每次接種前進行20分(fen)鐘(zhong)的紫(zi)外(wai)燈消毒。
(5)清理屋內帶(dai)菌(jun)(jun)組培(pei)(pei)苗。在(zai)植物病(bing)害中,真菌(jun)(jun)所引起(qi)的病(bing)害尤其嚴重,且因會產(chan)生孢子,隨著空(kong)氣飄散。一(yi)旦落入適當的環境下,一(yi)粒小小的孢子便(bian)會擴大成一(yi)個菌(jun)(jun)落,污染整個組織培(pei)(pei)養瓶(ping)。因此一(yi)旦有真菌(jun)(jun)污染的組培(pei)(pei)苗,就要用高壓滅菌(jun)(jun)器(qi)徹底消滅,以(yi)防(fang)擴散。
(6)接種不(bu)正確(que)。不(bu)正確(que)操作也(ye)會(hui)增加污(wu)染機率,如(ru)開(kai)蓋(gai)太快,滅(mie)菌不(bu)夠(gou),操作過(guo)慢等(deng)。接種過(guo)程應該輕(qing)開(kai)蓋(gai),快操作。
組培室污染原因
若污(wu)染(ran)菌(jun)(jun)類(lei)是零星分散在培養基中(zhong),則可確定是人為引起的污(wu)染(ran),比如培養基滅(mie)菌(jun)(jun)不(bu)徹底;超(chao)凈工作(zuo)臺長時(shi)間不(bu)換濾(lv)網(wang),致使凈化(hua)能力(li)降低;接種用具滅(mie)菌(jun)(jun)不(bu)徹底;操(cao)作(zuo)不(bu)正確,動作(zuo)生硬緩(huan)慢,開瓶(ping)時(shi)間太久,接種臺擺(bai)放物品雜亂(luan),操(cao)作(zuo)中(zhong)心(xin)在人體范圍(wei)之內;接種室長期不(bu)滅(mie)菌(jun)(jun),菌(jun)(jun)類(lei)太多(duo)等(deng)。
若污(wu)(wu)染(ran)(ran)菌(jun)類(lei)是(shi)從(cong)材(cai)料周圍長(chang)起,則可(ke)證明是(shi)植物材(cai)料帶(dai)菌(jun)引起。可(ke)能是(shi)接(jie)種(zhong)用具滅菌(jun)不(bu)徹底,接(jie)種(zhong)時材(cai)料被污(wu)(wu)染(ran)(ran);或者(zhe)是(shi)未及(ji)時發現污(wu)(wu)染(ran)(ran)苗,接(jie)種(zhong)過(guo)程交叉感(gan)染(ran)(ran)等。
若菌類從(cong)材(cai)料培養(yang)基以上(shang)部(bu)分(fen)長起,而(er)不(bu)是從(cong)培養(yang)基先長起,且發生(sheng)在5天以后,則說明(ming)是材(cai)料帶的內生(sheng)菌。若從(cong)培養(yang)基以下開(kai)始長菌,發生(sheng)時間較早,且有從(cong)里向外的趨勢,則說明(ming)是切口引(yin)起的污染,原因可能是滅(mie)完菌后,未剪(jian)去兩個切口或雖剪(jian)但器具帶菌。
污染苗如何搶救?
真菌(jun)(jun)污染后(hou),如果已形成孢(bao)子,則必須經高壓滅菌(jun)(jun)后(hou)扔(reng)掉(diao),即(ji)使僅(jin)形成菌(jun)(jun)絲也應處(chu)理后(hou)扔(reng)掉(diao),因為菌(jun)(jun)絲能(neng)夠達(da)到材料內(nei)部,因此,真菌(jun)(jun)污染是滅絕(jue)性的。
細菌污染后,由于細菌繁殖(zhi)是靠芽孢,細菌不會(hui)彌散在整個空間(jian),因此(ci)只要及時發現,可(ke)將(jiang)材(cai)料上部(bu)未(wei)感(gan)菌的部(bu)分剪下轉(zhuan)接,材(cai)料仍可(ke)以(yi)用。
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