一(yi)、培養材料的采集

組織培(pei)養(yang)所用(yong)的材料非常(chang)廣泛(fan)，可采(cai)取根、莖、葉、花、芽和種(zhong)子(zi)的子(zi)葉，有(you)時也利用(yong)花粉粒和花藥，其(qi)中根尖不易(yi)滅菌，一般很少(shao)采(cai)用(yong)。

 對(dui)于(yu)木(mu)本(ben)花卉來說，闊葉(xie)樹(shu)可(ke)在一(yi)、二年生(sheng)的(de)(de)枝條上采集，針(zhen)葉(xie)樹(shu)種多(duo)(duo)采種子內的(de)(de)子葉(xie)或胚軸，草(cao)本(ben)植物多(duo)(duo)采集莖尖(jian)。

在快速繁殖中，常用的培養材料是莖尖，通常切塊在0.5厘米左右，如果為培(pei)養無病(bing)毒(du)苗而采用的材料通常僅采取莖(jing)尖(jian)分生組(zu)織部分，其長度在0.1毫(hao)米以(yi)下。

二、培養材料的消(xiao)毒

1、先將材料用(yong)流(liu)水沖洗干凈，最后(hou)一遍用(yong)蒸餾水沖洗，再用(yong)無菌紗布或吸水紙將材料上的水分吸干，并(bing)用(yong)消毒(du)刀片切成小(xiao)塊(kuai)。

2、在無(wu)菌環境中將材料放(fang)入70%酒精中浸泡30-60秒。

3、再將材料移入漂白(bai)粉(fen)的飽和液或(huo)0.01%升汞(gong)水中消毒10分鐘。

4、取(qu)出(chu)后用(yong)無菌水沖洗三、四次。

三、制備(bei)外植體

將已消毒的(de)(de)材(cai)料，用(yong)無(wu)菌刀、剪、鑷等，在無(wu)菌的(de)(de)環境下剝去芽的(de)(de)鱗片(pian)、嫩枝的(de)(de)外皮和種皮胚乳等，葉片(pian)則不需(xu)剝皮。然后切成0.2-0.5厘(li)米(mi)厚的(de)小片，這就是外植體。在操(cao)作中嚴禁(jin)用手觸動材料(liao)。

四、接種和(he)培養

1、接種

在(zai)無菌環境下(xia)，將切好的外(wai)植體(ti)立即接(jie)在(zai)培養基上，每(mei)瓶接(jie)種(zhong)4-10個。

2、封口

接種后(hou)，瓶、管用(yong)無(wu)菌藥棉或(huo)蓋封口(kou)，培養器用(yong)無(wu)菌膠(jiao)帶封口(kou)。

3、溫度(du)

培養基大(da)多應(ying)保持在25°C左右，但要(yao)因(yin)花卉種類及材料(liao)部(bu)位(wei)的不同而(er)區(qu)別對待。

4、增(zeng)殖

外植體(ti)的增(zeng)(zeng)(zeng)殖(zhi)(zhi)是組培的關(guan)鍵階段，在(zai)新梢等形成后為了擴大繁殖(zhi)(zhi)系數，需(xu)要繼代培養(yang)。把材(cai)料分株或(huo)切(qie)段轉入增(zeng)(zeng)(zeng)殖(zhi)(zhi)培養(yang)基中，增(zeng)(zeng)(zeng)殖(zhi)(zhi)培養(yang)基一般在(zai)分化培養(yang)基上加以(yi)改良(liang)，以(yi)利于增(zeng)(zeng)(zeng)殖(zhi)(zhi)率的提高。增(zeng)(zeng)(zeng)殖(zhi)(zhi)1個月左右后，可(ke)視情況(kuang)進行再增殖。

5、根的誘導

繼(ji)代培(pei)養形成的(de)不定芽(ya)和(he)側芽(ya)等(deng)一般沒有根，必(bi)須(xu)轉(zhuan)到生根培(pei)養基上進(jin)行生根培(pei)養。1個月后(hou)即可獲得健壯根系

五(wu)、組培苗(miao)的練苗(miao)移(yi)栽

試管苗(miao)從無菌到(dao)光、溫、濕穩(wen)定的環境進(jin)入自然環境，必(bi)須進(jin)行練苗(miao)。一般移植前，先將培養容(rong)器打開(kai)，于室內自然光照下放(fang)3天，然后取(qu)出小苗，用自來水把根系上的營(ying)養基(ji)沖(chong)洗干凈，再栽入已準備好的基(ji)質中，基(ji)質使用前(qian)(qian)最好消毒(du)。移栽前(qian)(qian)要適當遮(zhe)蔭(yin)，加強水分管理(li)，保持(chi)較高的空氣濕度（相對濕度98%左右），但基(ji)質不宜過濕，以防(fang)爛苗。